人自然殺傷性細胞NK92

簡要描述：青旗（上海）生物技術發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術為主的研發(fā)、生產、培訓為一體的綜合化產業(yè)平臺，在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產經營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產品與服務。我們秉承對用戶負責的態(tài)度，以對科研的高度嚴謹，以嚴格的質量控制，為廣大生物醫(yī)學科研用戶提供更優(yōu)質的服務！

更新時間：2021-05-27

廠商性質：生產廠家

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號	BFN608006464
規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2	供貨周期	現貨
主要用途	僅供科研	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè)

細胞名稱	人自然殺傷性細胞NK92
貨物編碼	BFN608006464
產品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細胞數量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運輸方式	常溫保溫運輸	干冰運輸
安全等級	1
用途限制	僅供科研 3類

培養(yǎng)體系	The base medium for this cell line is Alpha Minimum Essential medium without ribonucleosides and deoxyribonucleosides but with 2 mM L-glutamine and 1.5 g/L sodium bicarbonate . To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: 0.2 mM inositol; 0.1 mM 2-mercaptoethanol; 0.02 mM folic acid; 100-200 U/ml recombinant IL-2; adjust to a final concentration of 12.5% horse serum and 12.5% fetal bovine serum.
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	人自然殺傷性細胞NK92是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細胞衍生來的一株白細胞介素-2依賴型NK細胞株。NK-92MI是轉染得到的源自NK-92的IL-2非依賴的NK細胞株，親本細胞通過微粒體基因轉化法用逆轉錄病毒MFG-hIL-2載體攜帶的人IL-2cDNA進行轉化。可能由于載體整合到基因組DNA中，轉化是穩(wěn)定的。這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性；鉻釋放試驗顯示它能殺死K562和Daudi細胞。NK-92細胞有以下特征：CD2 +, CD7 +, CD11a +, CD28 + , CD45 +, CD54 +, CD56 +, CD1 -, CD3 -, CD4 -, CD5 -, CD8 -, CD10 -, CD14 -, CD16 -, CD19 -, CD20 -, CD23 -, CD34 -, HLA-DR -。另本庫保藏有NK92MI細胞。二者均引種自ATCC。
補充	NK92細胞培養(yǎng)時，會有零星聚團現象，此時吹打散開即可。處于平臺期的細胞，會有少量呈現略不規(guī)則的圓形，此為正?，F象。血清建議使用BCK北美胎牛血清（貨號BCK041）與BCK馬血清（貨號BCK045)。
注釋	Part of: LL-100 blood cancer cell line panel. Characteristics: Laboratory use as a standard cell line for antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) testing. Also bBeing developed for cellular adoptive immunotherapy for cancers and viral infections. Characteristics: IL2 dependent. Characteristics: Does not express FCGR3A/CD16. Doubling time: 35.6 +- 6.1 hours (PubMed=31126350); ~40-50 hours (DSMZ). Transformant: NCBI_TaxID; 10376; Epstein-Barr virus (EBV). Omics: Deep exome analysis. Omics: Deep RNAseq analysis. Omics: Transcriptome analysis. Miscellaneous: Neukoplast is used as a trademark to refer to NK-92 cells that are available for non-human research applications while aNK is used as a trademark to refer to cells from the cGMP-grade NK-92 cell-line that is in use for therapeutic human testing. Caution: This cell line is exclusively owned and controlled by NantKwest, Inc. NantKwest and its affiliate, Brink Biologics, Inc. are the sole authorized distributors for both commercial and non-commercial research requestors. There are no other authorized commercial and noncommercial suppliers of NK-92 cells. Contact NantKwest and Brink Biologics for information concerning current inventory and cell line use and support. Derived from sampling site: Peripheral blood.
STR信息	Amelogenin X,Y CSF1PO 11,12 D5S818 12,13 D7S820 10,11 D13S317 9,12 D16S539 11,12 TH01 6,9.3 TPOX 8 vWA 18 (ATCC) 16,18 (DSMZ)
參考文獻	PubMed=25586472; DOI=10.1038/ncomms7025 Kucuk C., Jiang B., Hu X., Zhang W., Chan J.K.C., Xiao W., Lack N., Alkan C., Williams J.C., Avery K.N., Kavak P., Scuto A., Sen E., Gaulard P., Staudt L.M., Iqbal J., Zhang W., Cornish A., Gong Q., Yang Q., Sun H., d'Amore F., Leppa S., Liu W., Fu K., de Leval L., McKeithan T., Chan W.C. Activating mutations of STAT5B and STAT3 in lymphomas derived from gammadelta-T or NK cells. Nat. Commun. 6:6025-6025(2015) PubMed=26559813; DOI=10.1007/s00262-015-1761-x Suck G., Odendahl M., Nowakowska P., Seidl C., Wels W.S., Klingemann H.-G., Tonn T. NK-92: an 'off-the-shelf therapeutic' for adoptive natural killer cell-based cancer immunotherapy. Cancer Immunol. Immunother. 65:485-492(2016) PubMed=31126350; DOI=10.1186/s40425-019-0612-2 Yang H.G., Kang M.C., Kim T.Y., Hwang I., Jin H.T., Sung Y.C., Eom K.-S., Kim S.W. Discovery of a novel natural killer cell line with distinct immunostimulatory and proliferative potential as an alternative platform for cancer immunotherapy. J. Immunother. Cancer 7:138-138(2019) PubMed=31160637; DOI=10.1038/s41598-019-44491-x Quentmeier H., Pommerenke C., Dirks W.G., Eberth S., Koeppel M., MacLeod R.A.F., Nagel S., Steube K., Uphoff C.C., Drexler H.G. The LL-100 panel: 100 cell lines for blood cancer studies. Sci. Rep. 9:8218-8218(2019)

驗收細胞注意事項

1、收到人自然殺傷性細胞NK92細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

2、收到人自然殺傷性細胞NK92細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到人自然殺傷性細胞NK92細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到人自然殺傷性細胞NK92細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。

6、24 小時后，人自然殺傷性細胞NK92細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。